數字PCR是一種核酸檢測和定量的新方法。同傳統PCR以及qPCR相比，增加了一步分液的操作，將幾十微升的已經(jīng)配好的包含有引物、模板、buffer、酶等組分的PCR反應體系分隔成了眾多微小的、獨立的反應體系，這樣能夠直接數出DNA分子的個(gè)數，對起始樣品定量，通過(guò)將一個(gè)樣本分成幾萬(wàn)到幾百萬(wàn)份，分配到不同的反應單元，每個(gè)單元包含一個(gè)或多個(gè)拷貝的目標分子( DNA 模板) ，在每個(gè)反應單元中分別對目標分子進(jìn)行PCR擴增，擴增結束后對各個(gè)反應單元的熒光信號進(jìn)行統計學(xué)分析。如下圖：
 

　　PCR 運行可以分為三個(gè)階段：
 

　　指數期
 

　　每個(gè)循環(huán)積聚的產(chǎn)物準確加倍(假定 100% 反應效率)。該反應具有高度特異性和準確度。出現指數式擴增，因為所有試劑均新鮮可用，反應的動(dòng)力學(xué)推動(dòng)反應有利于擴增子加倍。
 

　　線(xiàn)性期(高變異性)
 

　　隨著(zhù)反應繼續，一些試劑因擴增而被消耗。反應開(kāi)始減緩，并且每個(gè)循環(huán)的 PCR 產(chǎn)物不再加倍。
 

　　平臺期(終點(diǎn)：使用傳統方法進(jìn)行凝膠檢測)
 

　　反應停止，不再產(chǎn)生更多產(chǎn)物，并且如果放置時(shí)間夠長(cháng)，PCR 產(chǎn)物將開(kāi)始降解。因為每個(gè)樣品具有不同的反應動(dòng)力學(xué)，所以每支試管或每個(gè)反應將在不同的時(shí)間點(diǎn)進(jìn)入平臺期。在平臺期可以看到這些差異。在平臺期內，傳統 PCR 進(jìn)行測量，又稱(chēng)為終點(diǎn)檢測。
 

　　數字PCR檢測的是游離DNA，采血管為游離DNA管，采樣5-10ml。檢測過(guò)程包括核酸提取、芯片制備、PCR擴增、芯片閱讀、結果分析，實(shí)現全程基本自動(dòng)化、封閉式操作，避免污染。無(wú)需培養，節省時(shí)間；高靈敏度，提高檢出率；多色熒光檢測，一管血可檢測23個(gè)靶標，節省寶貴樣本，幫助解決“檢出率低”和“檢測周期長(cháng)”兩大痛點(diǎn)，達到早期診斷、療效監測的目的。